تبلیغات
زیست شناسی - طرز تهیه برشها و نمونهای میكروسكوپی گیاهی

طرز تهیه برشها و نمونهای میكروسكوپی گیاهی

سه شنبه 7 مهر 1388 03:00 ق.ظنویسنده : سید حسین نقیبی

 

در بافت شناسی گیاهی، بررسی و مطالعه راجع به انواع بافتهای گوناگون گیاهی مستلزم تهیه برشهای مناسب و ظریف از اندامهای گیاهی می باشد. بدین منظور بهترین دستگاه در تهیه مقاطع و برشهای ظریف گیاهی¸ دستگاه میكروتوم می باشد.

 

اما با توجه به گران بودن وسائل آن و نیز مراحل طولانی تهیه برش و نیز رنگ آمیزی نمونهای گیاهی از  شیوهای  ساده  آزمایشگاهی در  جهت  تهیه برشها استفاده می كنیم. در ابتدا، اندام گیاهی مورد نظر را ازمحیط تهیــه نموده و سپس در صورت  نیــاز به شستشو آنــرا  با آب  معمولی  تمیـز می نمائیم. سپس با تیغ صورت  تراشی  معمولی اقدام به تهیه برشهای با ضخامت بسیار باریك می كنیم.

از نكات قابل توجه آنست كه:

1 _ جهت حركت تیغ به هنگام برش باید عمود بر اندام گیاهی مورد نظر باشد.

2 _ حركت دست حالت رفت و برگشتی نداشته باشد.

3 _ حركت دست سریع باشد.

4 _ با یك دست نمونه را بر روی تخته كار ثابت نگه داشته و با دست دیگر تیغ را از روی اندام عبورمی دهیم.

5 _ برشهای تهیه شده باید یك لایه سلولی باشد در غیر اینصورت به هنگام بررسی در زیر میكروسكوپ  توده سلولی می بینیم كه مناسب بررسی و مطالعه  نمی باشد.

6 _  برشهای  تهیه شده را سریعاً  به شیشه ساعتی محتوی آب مقطر انتقال  می دهیم  چرا كه در  هوای  آزاد  سریعاً خشك می شوند.

7 _  حداقل 10 برش گیاهی آماده  می كنیم.  برای  اینكه ممكن است برشهای تهیه  شده یا ضخیم شوند و یا  اینكه در اثر حركت نا مناسب تیغ، بافت مورد نظر له و پاره شود.   

 

         بعد از تهیه برشهای نازك و ظریف نوبت به رنگ آمیزی آنها می رسد. در رنگ آمیزی شیوهای متفاوتی وجود دارد از قبیل رنگ آمیزی منفرد و رنگ آمیزی مضاعف. در رنگ آمیزی منفرد عموماً  از یك معرف رنگی استفاده می گردد و در رنگ آمیزی  مضاعف  از دو و یا  چند  معرف رنگی استفاده  می گردد.  در اینجا  ابتدا  چند  معرف  رنگی  و فیكساتور  را  نام  برده  و  سپس  به  یك  شیوه  متداول آزمایشگاهی می پردازیم.

تعدادی معرفهای رنگی كه جهت رنگ آمیزی بافتهای گوناگون گیاهی استفاده می شود و تاثیر رنگی  آنها بر بافتهای مختلف گیاهی به شرح ذیل می باشد.

ردیف

نام معرف

نام بافت گیاهی

پس از رنگ آمیزی

فرمول شیمیائی

1

كارمن(Carmine)

پارانشیم سلولزی

ارغوانی

محلول اسید اتانولیك

2

متیلن آبی(Methylen Blue)

بافتهای چوبی

آبی

C16H18ClN3S.aq

3

سبز ید(Methyl Green)

بافتهای چوبی

سبز

C27H35Cl2N3, ZnCl2

4

بیسمارك(Bismark Brown)

دیواره سلولی

قهوه ای

C12H24N8, 2HCl

5

فوشین بازی(Fuchsin)

همه بافتها

قرمز

ماده آلی ازت دار

6

سافرانین(Safranin)

بافتهای چوبی

زرد

C20H19ClN4

7

قرمز روتنوم(Ruthenium Red)

تیغه میانی

صورتی

Cl6H42N14O2Ru3

8

هماتوكسیلین(Hematoxylin)

تیغه میانی

بنفش

-

9

لوگل

دانه نشاسته

آبی

-

 فیكساتور (F.A.A) كه از فرمالین (به میزان 5cc) و الكل اتیلیك50%( به میزان90cc)و اسید استیك(به میزان 5cc) تشكیل شده است جهت فیكسه كردن بافتها استفاده می شود.

+ نوشته شده توسط علی بیجندی در پنجشنبه 6 فروردین1388 و ساعت 9:18 |

آخرین ویرایش: - -

 
 
لبخندناراحتچشمک
نیشخندبغلسوال
قلبخجالتزبان
ماچتعجبعصبانی
عینکشیطانگریه
خندهقهقههخداحافظ
سبزقهرهورا
دستگلتفکر